Los modos de juego disponibles son los siguientes:

- Modo carrera

El modo carrera de Guitar Hero III cuenta con 4 dificultades (fácil, medio, difícil y experto). En total, tocaremos 42 canciones y tendremos tres encuentros con "jefes", que serán: Tom Morello, Slash y el mismísimo diablo (Lou). Estos combates musicales son duelos en el que nosotros y nuestro enemigo tocaremos una canción en la que en vez de tener energía ‘’rockera’’, tendremos ataques que podremos lanzar a nuestros enemigos levantando la guitarra verticalmente. Estos ataques van, desde romperle una cuerda hasta cambiarle la dificultad de sus notas, obviamente el también podrá atacarnos para lograr ganarnos.

A lo largo del juego iremos teniendo batallas con diferentes guitarristas que podremos comprar después de vencerles, estos son:

Slash (ex-guitarrista de Guns N’ Roses  y guitarrista de Velvet Revolver), Tom Morello (guitarrista de Rage Agains Machine, AudioSlave y Nightwachman) y Bret Michaels (vocalista de Poison), este último saldrá como vocalista y por lo tanto no se podrá utilizar. Estos personajes han sido creados a partir de la persona original contando con muchos de sus movimientos captados a través de sensores de movimiento, como podremos ver en los videos que podremos comprar en la tienda virtual del videojuego.

- Modo carrera cooperativa:

Será como la carrera en solitario pero con la ayuda de un segundo jugador, un jugador tocara como si controlara a un bajo, y el otro una guitarra eléctrica.

- Practica:

Podremos jugar cualquier canción del repertorio en cualquier dificultad sin seguir una historia ni nada, juego libre.

- Multijugador:

A continuación cito los modos disponibles dentro del modo multijugador, disponible para jugar con un segundo jugador que puede utilizar el mando normal de Xbox360 o bien una guitarra.

· Duelo: Tocaremos una canción con el segundo jugador, cada uno tocará un trozo de la canción hasta tocarla por completo.

· Duelo pro: Es parecido al duelo normal aunque en este cada jugador tocará la canción entera por si solo.

· Guerra: Tendremos que ganar a nuestro contrincante en cualquier canción, cada uno tocara un trozo de la canción y podremos utilizar ataques para que nuestro enemigo tenga mas dificultades en ganar. Utiliza el mismo sistema que en el modo carrera para terminar con los ‘’jefes’’.

- Ensayo:

Tendremos dos apartados, una serie de tutoriales para adentrarnos en el mundo rockero, y práctica, un modo en el que podremos practicar cualquier canción del juego tocando como bajo o guitarra y pudiendo escoger que trozo de la canción queremos tocar, así como también la velocidad a la que se reproduce.

- Xbox Live

Algo nuevo en esta entrega es la inclusión de un nuevo modo mediante el cual podremos combatir contra nuestros rivales en Xbox Live. Podremos jugar cualquier modalidad contra ellos, aunque probablemente la que tenga mas tirón será la de guerra, la más dinámica y posiblemente, la mas divertida de todas.